GPCR19激动剂（TGR5受体激动剂）实验操作规程如下：

一、细胞培养

在96孔板中每孔加入100μL细胞，通常用于细胞增殖实验时，每孔需要加入大约2000个细胞，而进行细胞毒性实验时，每孔则需加入5000至10000个细胞。具体的细胞数量应根据细胞大小和增殖速度等因素进行调整。随后将板放置在37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养24小时。

二、化合物处理

向每孔中加入适当浓度的测试化合物，体积范围为0至10μL。

三、孵育条件

将96孔板放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中，保持100%湿度，并孵育适当时间。

四、MTT溶液准备

将5×MTT稀释成1×MTT溶液。

五、MTT染色

向每孔添加50μL的1×MTT溶液，并在37℃下孵育4小时，以使MTT被还原为甲臜。

六、液体处理

吸出每孔的上清液，然后添加150μL的DMSO以使甲臜溶解，使用平板摇床充分摇匀。

七、光密度测定

使用酶标仪在570nm波长处测定每孔的光密度。如果没有570nm的滤光片，也可以使用560-600nm的滤光片进行测量。

八、结果分析

a. 细胞存活率计算：首先，将每个测试孔的OD值减去背景OD值（即培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔的OD值（即培养基加受试药物不同稀释度加MTT，无细胞）。计算各重复孔OD值的平均值±SD。细胞存活率以T/C%表示，其中T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。细胞存活率% = (加药细胞OD / 对照细胞OD) × 100。

b. IC50与IC90计算：求出在T/C为50%时的药物浓度（IC50）及在T/C为10%时的药物浓度（IC90）。

此方法为评估尊龙凯时所研发的GPCR19激动剂的生物医学潜力提供了系统化和标准化的指导，确保实验可靠性与数据准确性。