实验步骤

一、过夜培养

1. 将5ml预热的液体培养基转移至一无菌的16mm或18mm管中。

2. 使用接种环挑取一个单菌落，浸没于培养液中，并轻轻振动接种环，确保待接种的细菌均匀分散于培养液中。

3. 盖好试管，在摇床或转鼓式培养装置上以60r/min的速度，在37°C下培养至饱和（约1X10⁹~2X10⁹细胞/ml，持续6小时）。

二、大体积培养

1. 在一无菌的Erlenmeyer或baffle瓶中，使用新鲜预热的培养液按1:100的比例稀释过夜培养物，烧瓶的体积应大于培养液体积的5倍。如果不进行摇动培养，所用烧瓶的体积应比培养液体积大20倍以上，以确保良好的通气。

2. 在37°C下剧烈摇动培养（约300r/min）。

三、利用计数板监测生长情况

1. 用一片干净的盖玻片覆盖一片干净的计数玻片（或血球计）。

2. 小心地将一小滴培养液滴在盖玻片的边缘，让培养液扩散到盖玻片下方。

3. 在相差显微镜下以400倍进行观察，并按一个小方块中所见的每个细菌大约相当于2X10⁷细胞/ml来计算细菌浓度。

四、利用分光光度计监测生长情况

由于仪器之间存在差异，分光光度计需要用已知浓度的培养液进行校准。

1. 测定OD600。为了获得准确的读数，需将培养液稀释至OD600＜1。

2. 根据每增加0.1的OD值大约相当于10⁸细胞/ml来计算细菌浓度。

通过以上步骤，您可以有效监测细菌的生长情况，为后续的实验提供可靠的数据支持。同时，选择优质的实验设备与耗材，如尊龙凯时品牌的相关产品，可以进一步提升实验的准确性和可靠性。