微RNA(miRNAs)是一类高度保守的小型非编码RNA,通过促进信使RNA(mRNAs)的降解或抑制其翻译,调控基因表达。在人类中已有约2,500种miRNA被识别,其在细胞分化、增殖和细胞凋亡等重要生物过程中扮演着关键角色。miRNA表达的变化常常与病理状态及恶性肿瘤相关,因此miRNA被视为具备重要诊断价值的生物标志物及潜在的治疗靶点。随着miRNA检查技术在临床诊断中的不断发展,它为疾病的早期检测、个性化治疗及改善患者预后带来了新的希望。
miRNA的合成过程始于较长的初级转录产物pri-miRNA,经过多个步骤完成。首先,pri-miRNA在细胞核中被Drosha酶切割形成前体miRNA(pre-miRNA)。其次,pre-miRNA被转运至细胞质,并由Dicer酶进一步加工为成熟的miRNA。成熟的miRNA随后被纳入RNA诱导沉默复合体(RISC),并引导至目标mRNA分子。一旦结合,miRNA能够降解mRNA或抑制其翻译,在转录后阶段调控基因表达。
在临床诊断中,准确且灵敏地检测miRNA至关重要。常用的miRNA检测方法包括:1)Northern Blot,利用凝胶电泳分离RNA分子后,通过标记探针进行杂交以检测特定miRNA;2)定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR),将miRNA逆转录为cDNA,并使用特定引物进行定量扩增;3)微阵列分析,直接将miRNA与固定在微阵列平台上的互补探针杂交,能够同时分析多种miRNA;4)下一代测序(NGS),在miRNA特异性接头连接和扩增后进行高通量测序;5)原位杂交(ISH),利用标记探针在组织切片中检测miRNA,能够观察其在组织内的空间分布。
miRNAs在疾病诊断、预后及疗效监测中展现出巨大潜力。由于其在血液、唾液和尿液等体液中的稳定性,miRNAs被视为非侵入性诊断检测的理想候选者。此外,miRNAs通常在特定组织中显示出异常表达模式,使其在特定疾病或癌症的诊断中应用广泛。例如,miR-21和miR-155已被研究作为乳腺癌、肺癌和结直肠癌的生物标志物,可在血液样本中检测,有助于早期诊断及治疗监测。在心血管疾病方面,miR-208和miR-499在心肌梗塞时上调,成为早期标志。而在神经退行性疾病的研究中,脑脊液和血液中的miRNAs也为早期诊断提供了新机会。
除了体液检测外,原位杂交技术(ISH)允许在组织样本中直接观察miRNAs,从而明确组织特异性表达模式。ISH能够精确定位异常表达的miRNAs,比如检测乳腺癌中的miR-126表达,以帮助预测疾病发展及治疗反应。但需注意的是,miRNAs作为生物标志物的应用仍面临挑战亟待解决,包括标准化检测和定量程序的建立,以减少由样本变异性和技术因素引发的假阳性及假阴性结果。尽管存在这些困难,基于miRNA的生物标志物在提升诊断、预后及治疗反应方面展现了巨大的潜力,因此对其深入研究将有助于更好地理解并克服当前面临的限制。
在这一领域,尊龙凯时致力于推动miRNA相关技术的研发与应用,为临床提供更为先进的诊断工具,助力科学界迈向更高的成就。通过结合最新的生物医疗技术与strong>尊龙凯时的品牌优势,我们期待在不久的将来为患者带来更多福音。