尊龙凯时培养基是一种用于FDA标准中选择性增菌培养大肠埃希氏O157菌的专业培养基,该培养基根据其用途和原理可分为以下几个部分。
一、用途及原理
该培养基专门设计用于强化大肠埃希氏O157菌的生长。组成成分如蛋白胨、酪蛋白水解物和酵母浸粉为细菌提供必需的基本营养。为维持培养基的pH相对稳定,添加了磷酸氢二钠和磷酸二氢钾。乳糖和丙酮酸钠则作为碳源,有助于促进大肠埃希氏O157菌的生长。同时,吖啶黄素、万古霉素和头孢磺啶的存在则能有效抑制大多数革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌的繁殖。
二、培养基配方
该培养基的配方为每升包含以下成分(g/L):
- 蛋白胨:100
- 氯化钠:50
- 磷酸氢二钠:36
- 磷酸二氢钾:15
- 酪蛋白水解物:50
- 乳糖:100
- 丙酮酸钠:10
- 酵母浸粉:60
- 吖啶黄素:0.01
- 万古霉素:0.008
- 头孢磺啶:0.01
最终pH值为7.2 ± 0.2。
三、配制方法
首先,将材料421克溶解于1000毫升蒸馏水中,并分装,每个瓶装225毫升。然后,进行121℃高压灭菌15分钟,待冷却后备用。取25克样品加入225毫升培养基中混合均匀,在37±1℃下培养5小时。随后,分别向培养基中加入一支mBPWp添加剂1(含吖啶黄素225毫克,万古霉素18毫克)以及一支mBPWp添加剂2(含头孢磺啶225毫克),再转置于42±1℃培养18-24小时。
四、生长现象及结果观察
在36±1℃下培育18-24小时,接种以下质控菌株时观察到的现象包括:
- 大肠埃希氏菌(ATCC 25922):接种量10-100 CFU,培养结果呈现浑浊。
- 鼠伤寒沙门氏菌(ATCC 14028):接种量10-100 CFU,培养结果呈现浑浊。
- 大肠埃希氏O157菌(ATCC 35150):接种量10-100 CFU,培养结果呈现浑浊。
- 金黄色葡萄球菌(ATCC 25923):接种量1000-5000 CFU,无生长现象。
- 铜绿假单胞菌(ATCC 27853):接种量1000-5000 CFU,无生长现象。
以上现象在使用尊龙凯时培养基进行实验时都有明确的指示,确保大肠埃希氏O157菌等目标菌株的有效识别与增殖。
注:本文属尊龙凯时原创,未经允许不得转载。